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人工脂质膜重组电生理系统

规格型号:Ionovation scout
仪器分类:分析仪器 -> 电化学仪器 -> 其他
生产厂商: 德国Ionovation
仪器类别: 通用
河南大学
Ionovation Scout采用了人工生物脂质膜来构建离子通道的测量方法。该系统使用两个独立的电生理测量室进行测量。该双层室由一个25μm厚、直径120微米的聚四氟乙烯隔膜隔开(a)。两个聚碳酸酯小室的体积分别为1.2 ml。聚碳酸酯小室顶部有孔,方便接入的Ag / AgCl电极和注入缓冲液(a)。当两个腔室中填充有合适的缓冲液时,溶解在正癸烷的脂质被分散到直径120微米的特氟隆隔膜的微孔( b)中。缓冲液的液面经过连续地降低和升高过程,直到特氟隆隔膜上的过量脂质被除去,特氟隆隔膜上形成脂双层自组织形成的人工生物脂质膜(C)。

然后根据具体的目的蛋白或者细胞器等进行操作。比如类似于α-溶血素的毒素,可以直接加入聚碳酸酯小室中进行测试。而需要重组的离子通道则需要将其与脂肪酸结合为重组脂蛋白,然后将这些脂蛋白或者从生物膜上“剪下”囊泡与人工生物脂质膜通过离子梯度或融合肽方法进行融合。

准备好样品后,开始进行电生理学测试。通过施加不同的电压,来监测细胞单离子通道的电流,其中在5-10 kHz带宽的信号会存储在系统的硬盘上,测试通常采用的模式是电压钳模式
1.脂质触发器

2.细胞膜转运处理

3.膜活性剂比如突触核蛋白

4.药物安全分析

5.信号转导模式分析
1. 测量对象:可实现对上万种离子通道、转运体和孔隙活动的精确测量;

2. 软件:电生理数据采集分析软件Patchmaster,采用用户界面友好的软件实现测量全部控制;具备预定义协议式的用户定义实验工作流程;

3. 自动操作:全自动设备操作(双层生产和验证、双层完整性的电容控制、膜双侧灌注系统);双层分子可视化操作;

4. 电流测量:稳定低噪声Ag/AgCl电极,采用盐桥记录电流范围从pA到
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